ABSTRACT
Some species of filamentous fungi that infest agricultural commodities are able to produce mycotoxins, contaminating feed and animal products. The aim of this research was to identify the mycoflora present in the feed and forage for dairy goat and to isolate and characterize the Aspergillus flavus and A. parasiticus strains based on a morphological and molecular characterization and mycotoxigenic ability. The goat dairy diets were collected monthly from 11 goat milk farms, totaling 129 and 106 samples of concentrate and forage, respectively. For the isolation of the mycobiota the surface plating method was used. Aspergillus, Penicillium, and Fusarium were the main fungi producing mycotoxins isolated. The morphological and molecular characterization and mycotoxigenic ability were used for A. flavus and A. parasiticus identification. The Aspergillus spp. from feed 39% produced aflatoxins B1 and B2, 17% produced cyclopiazonic acid (CPA), 18% produced both toxins, and 42% had no toxigenic ability. Only 2.0% of the strains produced aflatoxins B1, B2, G1, and G2, but no CPA. The strains from forage were producers of aflatoxins B1 and B2 (37%), CPA (14%), 14% of both mycotoxins, whereas 49% have shown no toxigenic ability. The aflD and aflR genes were used by PCR and PCR-RFLP, respectively. The presence of toxigenic species in samples of feed for lactating goats indicates a potential risk of contamination of dairy products, if they are exposed to environmental conditions favorable to fungal growth and mycotoxin production.
Algumas espécies de fungos filamentosos que infestam os produtos agrícolas e ração são capazes de produzir micotoxinas. O objetivo deste trabalho foi identificar a micoflora presente nos concentrados e volumosos utilizados na dieta de cabras leiteiras e isolar as espécies Aspergillus flavus e A. parasiticus, com base em uma caracterização morfológica e molecular e capacidade micotoxigênica. Os alimentos foram coletados mensalmente em 11 fazendas produtoras de leite de cabra, totalizando 129 e 106 amostras de concentrado e volumoso, respectivamente. Para o isolamento da micobiota, foi utilizado o método de plaqueamento de superfície. Aspergillus, Penicillium e Fusarium foram os principais gêneros de fungos produtores de micotoxinas isolados das amostras. A caracterização morfológica e molecular e capacidade micotoxigênica foram utilizadas para identificação de A. flavus e A. parasiticus. Das cepas Aspergillus spp isoladas do concentrado, 39% produziram aflatoxinas B1 e B2, 17% produziram ácido ciclopiazônico (ACP), 18% produziram ambas as toxinas e 42% não tinham capacidade toxigênica. Apenas 2,0% das cepas produziram aflatoxinas B1, B2, G1 e G2. As cepas de Aspergillus spp. isoladas do volumoso foram produtores de aflatoxinas B1 e B2 (37%), ACP (14%), sendo que 14% produziram ambas toxinas e 49% não foram produtoras. Os genes aflD e aflR foram utilizados para a PCR e a PCR-RFLP, respectivamente. A presença de espécies toxigênicas em amostras de alimentos destinados a caprinos em lactação indica um risco potencial de contaminação dos produtos lácteos por aflatoxinas e ACP, caso estes sejam expostos a condições ambientais favoráveis ao crescimento de fungos e produção de micotoxinas.
ABSTRACT
Apesar da importância dos fitopatógenos pertencentes à Ordem Pucciniales (=Uredinales), popularmente denominados de ferrugens, certas particularidades de sua biologia são pouco conhecidas, principalmente devido à dificuldade de cultivá-los em meios de cultura e também pela falta de metodologias adequadas ao desenvolvimento das pesquisas. Portanto, o objetivo deste trabalho foi verificar a eficiência de aparatos denominados "germinatélios" para a obtenção de dados sobre a produção de basidiósporos e biologia de diferentes espécies de Pucciniales. Foram utilizadas no estudo as espécies Puccinia psidii, P. pampeana, P. pelargonii-zonalis, P. arachidis, P. mogiphanis, P. emiliae, P. hetereospora, P. malvacearum e P. cnici oleracei. A utilização dos "germinatélios" permitiu constatar elevada produção de basidiósporos (estruturas infectivas) por um período de até 5 meses, à temperaturas entre 12 a 21oC. Além disso, em P. malvacearum foi possível registrar a germinação por repetição (estratégia de sobrevivência) em 4,5% dos basidiósporos produzidos. Todas as espécies foram favorecidas a temperaturas amenas. Estes resultados demonstram, portanto, que a utilização dos "germinatélios" é eficiente, auxiliando na obtenção de dados sobre a biologia e ciclos de diferentes espécies de Puccinia, possibilitando melhor conhecimento sobre estes fitopatógenos, resultando em medidas de manejo e controle mais adequadas/precisas.
Despite the importance of plant pathogens belonging to the Order Pucciniales (=Uredinales), popularly called rusts, certain peculiarities of its biology is poorly known, mainly due to the difficulty of growing them in culture media and also by the lack of appropriate methodologies for the development of research. Therefore, this study was to verify the efficiency of apparatus called "germinatelia" to obtain data about the basidiospores production biology of different Pucciniales species. Were used in the study Puccinia pampeana, P. psidii, P. pelargonii-zonalis, P. arachidis, P. mogiphanis, P. emiliae, P. hetereospora, P. malvacearum and P. cnici-oleracei. The use of "germinatelia" have revealed high basidiospores production for a period up to 5 months at temperatures between 12o and 21oC. Furthermore, in P. malvacearum was possible to record the germination by repetition (survival strategy) in 4.5% of basidiospores produced. All species were favored to mild temperatures. These results therefore demonstrate that the use of "germinatélios" is efficient, assisting in obtaining data about the biology and cycles of different Puccinia species, enabling better understanding of these pathogens, resulting in management and control measures most appropriate/accurate.